Để có thể cài dc gen cần chuyển vào plasmit hoặc phage, người ta sử dụng ezim cắt giới hạn, một loại ezim có khả năng nhận ra một trình tự ADN đặc thù được gọi là vị trí giới hạn và cắt cả loại ADN của thể truyền và gen cần chuyển tại vị trí giới hạn để tạo ra cùng một loại đầu dính (sole hay bằng ). Mỗi loại ezim cắt giới hạn có vị trí cắt khác nhau và tạo đầu dính khác nhau . Theo bạn khi sử dụng ezim cắt giới hạn trong kỹ thuật cần lưu ý điều gì ???
Hãy nhập câu hỏi của bạn vào đây, nếu là tài khoản VIP, bạn sẽ được ưu tiên trả lời.
Đáp án C
A sai. Vì khi đó đầu dính được tạo ra bởi 2 loại enzyme cắt giới hạn X và Y khác nhau nêu Ligaza không nối lại để tạo ADN tái tổ hợp.
B sai. Vì CaCl2 và xung điện cao áp là các nhân tố làm giãn màng sinh chất được áp dụng cho việc đưa ADN tái tổ hợp vào tế bào nhân.
D sai. Vì khi hòa tan thì plasmit bị cắt mở vòng tại nhiều điểm bởi cả 2 loại enzyme X và Y. Đoạn ADN bị cắt bởi em ezyme cắt giới hạn X và Y. Kết quả không tạo ADN tái tổ hợp
Đáp án:
Chỉ cần dùng 1 enzim cắt giới hạn.
Vì việc cắt ADN và cắt thể truyền do cùng một loại enzim thì mới tạo ra các đầu dính phù hợp với nguyên tắc bổ sung, do đó chúng mới nối với nhau được.
Đáp án cần chọn là: D
Đáp án: C
Trình tự các bước trong kĩ thuật chuyển gen bằng plasmid là:
(2) - (4) - (1) - (3) - (5) - (6)
Đáp án B
- Trình tự các bước trong kĩ thuật di truyền là
Bước 1: Tách thể truyền (plasmit) và gen cần chuyển ra khỏi tế bào
Bước 2: Xử lí plasmit và ADN chứa gen cần chuyển bằng cùng một loại enzim cắt giới hạn
Bước 3: Trộn 2 loại ADN với nhau và cho tiếp xúc với enzim ligaza để tạo ADN tái tổ hợp
Bước 4: Đưa ADN tái tổ hợp vào trong tế bào nhận
Bước 5: Chọn lọc dòng tế bào có ADN tái tổ hợp
Bước 6: Nhân các dòng tế bào thành các khuẩn lạc.
Đáp án C
Trình tự kỹ thuật chuyển gen:
- Tách thể truyền (plasmit) và gen cần chuyển ra khỏi tế bào
- Xử lý plasmit và ADN chứa gen cần chuyển bằng cùng một enzim cắt giới hạn
- Trộn 2 loại ADN với nhau và cho tiếp xúc với enzim ligaza để tạo ADN tái tổ hợp
- Đưa ADN tái tổ hợp vào trong tế bào nhận
- Chọn lọc dòng tế bào có ADN tái tổ hợp
- Nhân các dòng tế bào thành các khuẩn lạc.